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親和柱☁↟₪₪、免疫親和柱☁↟₪₪、柱層析之間的聯絡

 釋出時間╃••╃╃:2023-01-17    點選量╃••╃╃:42
  一☁↟₪₪、將與純化物件有專一結合作用的物質連線在不溶性載體上·•₪✘•,製成親和吸附劑後所裝的柱·•₪✘•,多用做親和層析✘·。
 
  二☁↟₪₪、柱層析技術(Columnchromatography)又稱柱色譜技術·•₪✘•,主要原理是根據樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配係數不同·•₪✘•,經多次反覆分配將組分分離開來✘·。
 
  三☁↟₪₪、柱層析操作時·•₪✘•,先在圓柱管中填充不溶性基質·•₪✘•,形成一個固定相✘·。將樣品加到柱子上·•₪✘•,用特殊溶劑洗脫·•₪✘•,溶劑組成流動相✘·。在樣品從柱子上洗脫下來的過程中·•₪✘•,根據樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配係數不同·•₪✘•,經多次反覆分配將組分分離✘·。
 
  四☁↟₪₪、溼法裝柱是先把矽膠用適當的溶劑拌勻後·•₪✘•,再填入柱子中·•₪✘•,然後再加壓用淋洗劑“走柱子”·•₪✘•,本法最大的優點是一般柱子裝的比較結實·•₪✘•,沒有氣泡✘·。幹法裝柱則是直接往柱子裡填入矽膠·•₪✘•,然後再輕輕敲打柱子兩側·•₪✘•,至矽膠介面不再下降為止·•₪✘•,然後再填入矽膠至合適高度·•₪✘•,最後再用油泵直接抽·•₪✘•,這樣就會使得柱子裝的很結實✘·。接著是用淋洗劑“走柱子”·•₪✘•,一般淋洗劑是採用TLC分析得到的展開劑的比例再稀釋一倍後的溶劑✘·。
 
  五☁↟₪₪、免疫親和層析(IAFC)免疫親和層析以抗原抗體中的一方作為配基親和吸附另一方的分離系統稱為免疫親和層析✘·。IAC也是色譜技術的一種,可稱為免疫色譜技術,是一種利用抗原抗體特異性可逆結合特性的SPE技術,根據抗原抗體的高選擇性,從複雜的待測樣品中提取目標化合物✘·。主要原理是將抗體與惰性微珠共價結合,然後裝柱,將抗原溶液過免疫親和柱,而非目標化合物則沿柱流下,最後用洗脫緩衝液洗脫抗原,從而得到純化的抗原,用適當的緩衝液和合適的儲存方法,柱可以再生備用✘·。

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