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解析鼠抗黃麴黴毒素B1單克隆抗體中的黃麴黴毒素B1

點選次數╃↟:74次  釋出時間╃↟:2022-08-09
  鼠抗黃麴黴毒素B1單克隆抗體中的黃麴黴毒素B1存在於穀物·✘▩、堅果·✘▩、棉花籽及其他食品或飼料中✘•·,具有很強的致癌性✘•·,對人和若干動物具有強烈的毒性✘•·,其毒性作用主要是對肝臟的損害·│₪☁•。本抗體為黃麴黴毒素B1單克隆抗體✘•·,該抗體可應用於ELISA·✘▩、膠體金·✘▩、免疫親和柱層析等免疫檢測·│₪☁•。
 
  黃麴黴毒素B1在自然界分佈的黃麴黴中✘•·,約有20%的菌株能產生黃麴黴毒素·│₪☁•。其中花生·✘▩、玉米·✘▩、黃豆及棉籽等作物與其副產品易感染黃麴黴毒素✘•·,含黃麴黴毒素量較多✘•·,食入後在動物體內主要存在於如肝臟·✘▩、尿與糞便中·│₪☁•。黃麴黴毒素是一種肝臟毒素✘•·,能引起肝細胞變質·✘▩、壞死·✘▩、出血;目前✘•·,黃麴黴毒素的酶聯免疫法✘•·,免疫膠體金法等檢測方法均需要黃麴黴毒素抗原抗體·│₪☁•。
 
  黃麴黴毒素B1的合成方法╃↟:
 
  (1)黃麴黴毒素半抗原合成
 
  20-100mg黃麴黴毒素溶於丙酮中✘•·,10%硫酸中✘•·,於60℃攪拌反應✘•·,3h後✘•·,蒸乾丙酮✘•·,洗滌4次✘•·,蒸乾後得到黃麴黴毒素半抗原·│₪☁•。
 
  (2)黃麴黴毒素全抗原(人工抗原·✘▩、完全抗原·✘▩、酶標抗原)合成
 
  將黃麴黴毒素半抗原與牛血清白蛋白偶聯得到免疫抗原·│₪☁•。
 
  取60mg牛血清白蛋白溶於9.5mlPBS(0.01mol/L,pH5.0)溶液中✘•·,加入50微升室溫攪拌1h✘•·,用0.01mol/LPBS透析3天✘•·,每天換3次透析液✘•·,得到黃麴黴毒素與牛血清白蛋白的免疫抗原·│₪☁•。
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